浙江
你一定有过这种体验。深夜的实验室，离心机嗡嗡转着，你像个等待开奖的赌徒，紧张地凑到屏幕前，心里默念了三遍「求求了这次一定要成」，仪式感不亚于寺庙求签。下一秒，你愣住了。
它确实「成了」—— 以一种你完全没预料到的方式：
条带弯成了笑脸，细胞排成了爱心，菌落长成了星座图。
下面，请欣赏第一届实验室非正式艺术展——
*参展作品均由不知名的移液枪手、离心机操作员和培养箱守夜人倾情提供。
你看，共聚焦下的细胞，它阿巴阿巴。
图源：小红书
你看，平板上放飞自我的菌落，网友：眼球菌！瞳孔放大菌！
图源：小红书
下面这位跑胶跑出 6 只 QQ 企鹅的，比较起来倒显得具象化了。
图源：小红书
而明明是分组加的蛋白，为什么 …… 搁这弹上钢琴了？
你是在弹钢琴吗？ 图源：小红书
这些玄学名场面里，有一位常年霸榜的神图量产之王：Western Blot。
它太经典了。经典到每个分子生物狗都和它有过一段「明明按 protocol 来了啊」的血泪史。别的实验翻车还能笑，WB 翻车直接要命 ——
条带一丑，组会发抖。
有网友跑出了，电影院五连座 —— 谁懂啊，C 位甚至是个按摩椅！！！
图源：小红书
网友神评：差评，扶手太小了没法放爆米花
再看着这对「大眼瞪小眼」的怪诞形状，不禁高唱：「你是我的眼 ～～～陪我领略 ......」
图源：小红书
作者锐评：许嵩，这次我真的在搞原创 ~
以为会看到清晰的目的条带，结果收获了一对「时尚单品」。
这位网友你真的冒昧 图源：小红书
鸭（鸡）or 蛋的起源问题。
嗯？先有鸡还是先有蛋 图源：小红书
紧接着网友跟了一个由大到小的「蛋」。
哦莫 大大大小小小~1234567... 图源：小红书
被神奇 WB 条带苦苦折磨的广大硕博不禁发问 ——
所以，我的 WB 到底还有没有救？
别急。你离一条漂亮的 WB，可能就差一张「对症下药」的排查清单。
下面，学霸君将详细拆解它们的真实成因，并给出真正能落地的解决思路。不烧符纸，不靠玄学，咱们用科学把条带「正」回来。
NO.1 哑铃状条带
你别说，什么配重都有呢 图源：网络
原因分析：
1. 制胶液未混匀或含杂质，凝胶凝固不均；
2. 蛋白样本含不溶性杂质。
改进方法：
1. 制胶液充分溶解混匀，凝胶现用现配；
2. 蛋白上样前离心，取上清。
NO.2条带弥散
绷不住了，这都是些啥 图源：网络
原因分析：
1. 电泳电压过低；
2. 转膜夹松紧不适、电流过大或时间过长产热致凝胶变形；
3. PVDF 膜湿润不均、污染或过期，滤纸重复使用，转膜液配比错误或含杂质。
改进方法：
1. 使用新鲜电泳液，调整电压；
2. 转膜液新鲜配制并预冷，全程低温，合理设置电流；
3. 转膜夹松紧适中，PVDF 膜完好，滤纸不重复使用。
NO.3微笑/哭脸条带
笑一笑算了，要不还是哭吧 图源：网络
原因分析：
1. 电泳液重复使用或配比错误；
2. 凝胶放置过久干燥或凝固不均；
3. 电压过高。
改进方法：
1. 使用新鲜电泳液（≤3 次），正确配比；
2. 凝胶现用现配，制胶前混匀；
3. 浓缩胶 60-80V，分离胶 80-120V。
NO.4膜上小黑点
咦 看着头皮有点发麻 图源：网络
原因分析：
1. 转膜液或封闭液未充分溶解；
2. PVDF 膜过期或损坏，二抗重复使用；
3. 脱脂奶粉封闭引起非特异性结合。
改进方法：
1. 液体充分溶解后使用；
2. 用新鲜 PVDF 膜，二抗使用 ≤3 次；
3. 必要时改用 BSA 封闭。
NO.5条带一边亮一边暗
这是所有里面最正常的 图源：网络
原因分析：
1. 发光底物或一抗、二抗不均或覆盖不足；
2. 转膜夹过松致转移不均。
改进方法：
1. 摸索最佳上样量，发光液或一抗、二抗充分覆盖；
2. 转膜夹松紧适中。
NO.6个别条带拖尾
Hello，你是长头发了吗？ 图源：网络
原因分析：
1. 上样量过大或一抗浓度过高；
2. 蛋白降解或溶解不佳形成聚集体；
3. 分离胶浓度过高、缓冲液 pH 问题或电泳产热严重，蛋白刚开始没跑下去。
改进方法：
1. 调整上样量及抗体条件；
2. 冰上提取蛋白，加蛋白酶抑制剂，-80℃ 分装保存，上样前离心；
3. 选合适浓度分离胶，用新鲜电泳液，长时间电泳加冰袋控温。
好啦，看完这些是不是想立刻跑一波 WB 试试水？跑胶前牢记口诀：「样要匀、液要冷、抗体要专一」，该排查的排查，该优化的优化。
相信大家的手机相册里，一定也有「不舍得删」的实验神图 ——是歪成贪吃蛇的 WB 条带？是长成骷髅脸的细胞？还是小鼠的神奇发型？
欢迎在评论区狠狠砸图，让我们一起评选本届「实验室艺术大赏」的冠军。点赞最高的那位，我单方面宣布：你就是你们课题组的「实验毕加索」，下次组会 PPT 记得把这张图放进去，保准让导师眼前一亮 。
来吧，评论区交给你！
题图来源：图虫创意
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