复方1区if7+: 广州中医药大学等揭示息风止抽汤通过调节神经炎症和神经递质稳态缓解抽动障碍

【写在前面】：本期推荐的是由广州中医药大学第二临床学院、深圳市儿童医院等研究团队合作近期发表于Chinese Medicine(IF7.4）的一篇文章，揭示清息风止抽汤通过调节神经炎症和神经递质稳态缓解幼年大鼠抽动障碍：Nr4a2和肠道微生物群的双重调节。

【期刊简介】

【题目及作者信息】

Xifeng Zhichou decoction mitigates tic disorder on juvenile rats by regulating neuroinflammation and neurotransmitter homeostasis: dual modulation of Nr4a2 and gut microbiota

背景

息风止抽汤是一种改良的中药制剂，在治疗抽动障碍（TD）方面显示出显著的临床疗效。然而，其疗效和治疗机制仍不够明确。

目的

本研究旨在全面评估XFZCD在大鼠模型中的抗TD作用，并阐明其潜在机制。

方法

超高效液相色谱-质谱（UPLC-MS）用于XFZCD的质量分析，而网络药理学用于预测核心化合物和潜在机制。通过腹腔注射3,3-亚氨基二丙腈建立幼年TD大鼠模型，并使用行为测试、细胞因子测定和免疫组织化学评估XFZCD的治疗效果。通过研究调控基因和肠脑轴，采用转录组学和16S rRNA测序来阐明其机制。Western blot（WB）和酶联免疫吸附试验用于聚焦和验证潜在机制。非靶向代谢组学从末端代谢物的角度确认了关键途径。此外，在脂多糖（LPS）攻击的SH-SY5Y细胞中进行了Nr4a靶向siRNA敲除，以验证Nr4a2在XFZCD介导的神经保护中的核心调节作用。

结果

UPLC-MS分析鉴定了XFZCD中的66种化合物。网络药理学在富集分析中强调了5-羟色胺能和多巴胺能突触以及JAK-STAT信号，表明XFZCD通过调节神经炎症和神经递质稳态来治疗TD。XFZCD显著减轻了大鼠模型中的抽搐、异常运动行为和厌食症，同时也减轻了纹状体神经炎症和氧化应激，从而对TD表现出显著的治疗作用。转录组学分析确定Nr4a2是一个关键的调控基因，它与通过网络药理学鉴定的核心成分表现出很强的结合亲和力。16S rRNA测序显示，XFZCD通过恢复厚壁菌门/拟杆菌门的比例来调节肠道功能。WB和ELISA实验证实，XFZCD可以抑制炎症反应，恢复中枢神经递质稳态。非靶向代谢组学表明，XFZCD逆转TD导致胆汁酸代谢异常，这与肠道微生物重塑密切相关。细胞实验证实，Nr4a2沉默在很大程度上消除了XFZCD对神经炎症的抑制作用及其对神经递质平衡的调节功能。

结论

XFZCD通过Nr4a2和肠道菌群的双重调节抑制炎症和平衡神经递质，在治疗TD方面显示出显著疗效。值得注意的是，Nr4a2和胆汁酸代谢的调节成为治疗TD的有前景的治疗途径。

图文摘要

【前言】

抽搐障碍（TD）是一种复杂的神经发育障碍，在儿童中非常普遍。中国的一项全国流行病学调查显示，6-16岁学龄儿童和青少年中TD的患病率为2.46%。TD患者经常出现突然、快速、重复和有节奏的运动抽搐和/或声音抽搐，这会导致学业、社会和精神问题，严重影响儿童及其家庭的生活质量。目前，用于TD临床治疗的α2-肾上腺素能激动剂和抗精神病药物因其副作用如体重增加、嗜睡、锥体外系症状和代谢异常而在临床应用中受到限制。因此，迫切需要开发安全有效的TD药物治疗方法。

根据中医理论，TD的发病机制与肝风内蕴有着错综复杂的联系。镇静肝脏以祛风的治疗策略显示出有希望的临床效果，报告的不良反应很少。XFZCD是深圳儿童医院通过广泛的临床实践开发的经典中药方剂的独特配方。临床上，它已被证明在降低TD儿童抽搐频率和改善相关指标方面具有强大的临床疗效，包括耶鲁全球抽搐严重程度量表（YGTSS）评分。然而，系统研究的不足和机制的不明确阻碍了其标准化发展和更广泛的临床应用。

在这项研究中，使用UPLC-MS对XFZCD的成分进行了定性分析，以说明化学成分，并进行了网络药理学研究，以预测核心成分和多靶点治疗特征。采用幼年大鼠建立TD模型，模拟TD儿童的临床特征。通过行为表现、神经炎症、氧化应激和小胶质细胞活化系统地评估了XFZCD的效果。使用转录组学和16S rRNA测序探索了机制见解，重点关注调控基因和肠脑轴。进行了进一步的研究，包括代谢组学、ELISA、WB和LPS刺激的SH-SY5Y细胞中siRNA介导的Nr4a2敲除，以验证分子机制。本研究提供了将Nr4a2和肠道微生物群调节与TD中的神经炎症和神经递质调节联系起来的机制证据，从而支持XFZCD作为TD的有前景的多靶点治疗候选者。

【结果部分】

1.XFZCD 的化学表征与网络药理学分析。

2.XFZCD 对TD大鼠抽动样行为、神经炎症、氧化应激及小胶质细胞活化的影响。

3.对TD大鼠（n=3）纹状体组织进行的转录组分析。

4.肠道微生物群的16S rRNA基因测序分析（n=6）。

5.验证 XFZCD 对TD大鼠胆汁酸代谢、神经递质稳态及Nr4a2信号通路的影响。

6.敲低Nr4a2基因可减弱含 XFZCD 血清在LPS刺激的SH-SY5Y细胞中的抗炎作用。

7.XFZCD 治疗TD的作用机制示意图。

【结论与讨论】

本研究证实， XFZCD 在缓解TD症状方面具有显著的治疗效果。其作用机制与神经炎症及神经递质平衡的调节密切相关，而这两者均受Nr4a2和肠道微生物群的共同调控。值得注意的是，Nr4a2在抑制炎症反应和增强多巴胺能活性方面的双重调节功能，凸显了其作为治疗TD的潜在靶点价值（图7）。

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