目前常用的监测动物脊髓血流动力学的方法有氢清除法,微球法,放射自显影法,激光多普勒法闭合性脊髓窗技术。其中前四者只能用来监测脊髓血流量的变化 指标单一很难全面地反映脊髓血流动力学的变化 并且存在着对脊髓组织有损伤,需要加入外源性标记物或具有放射性,空间分辨率不够高等缺陷;闭合性脊髓窗技术可以研究脊髓微循环的血流动力学变化如血管管径、白细胞粘附现象和红细胞流速,但动物模型制作复杂,对仪器和熟练程度要求高,难于掌握。
优势:
激光散斑成像作为一种新的区域性流速监测技术,能够实现在无需扫描的条件下,以较高的空间分辨率(13μm)和时间分辨率(25ms)活体、动态、非接触地监测血流速度、血管管径和血流量的变化,获得血流动力学的多个指标。采用激光散斑成像技术监测大鼠脊髓正常状态和压迫刺激后脊髓背部表面血管内的血流速度和血流量以及血管管径的变化,为脊髓血流动力学的研究提供一种新方法。激光散斑成像技术无需注入造影剂,无需扫描,操作简便,可透过硬脊膜或其他一定厚度组织,以较高的空间分辨率(13μm)和时间分辨率(25ms)活体、动态、非接触地监测血流动力学的变化,获得血流速度、血管管径和血流量的多个血流动力学指标,并且能够明显地观察血流方向,从而区分动、静脉。处理后的伪彩色血流图可以直观地观察血流速度的变化和血管的膨胀或收缩,还可以从伪彩色血流图上任意选择感兴趣的区域进行血流动力学的研究。
![]()
激光散斑成像系统示意图
实验步骤
成年雌性SD大鼠10只,体重(250±20)g。所有大鼠用10%水合氯醛(400mg/kg)腹腔注射麻醉。咬除T10﹑T11椎板,暴露该节段硬脊膜,用于探测脊髓血流动力学的变化。将35g重物通过2.2mm×5.0mm弧形光滑金属垫片压迫于该段脊髓后正中部,时间为5min,制备脊髓压迫刺激模型。用立体定位仪固定大鼠脊柱,以消除因呼吸所造成的脊柱运动。用电热毯保持大鼠肛温在37~39℃。实验时在暴露的硬脊膜表面不断滴加温热(38℃)的生理盐水,以尽量保持脊髓的正常生理状态。
激光散斑成像:
将制作好的大鼠脊髓模型放在体视显微镜的正下方,调焦,以能够清楚地观察到大鼠脊髓背部为准。先用白光照射大鼠脊髓背部,利用激光散斑成像系统透过硬脊膜获得正常大鼠脊髓背部表面血管的白光图‚再改用激光,透过硬脊膜,由计算机控制在动物模型制作成功后即刻(0min)和10min分别连续采集20帧正常脊髓背部表面血管的原始散斑图像,然后保持大鼠位置不动,施行压迫刺激,10min后再采集20帧原始散斑图像。每帧原始散斑图像大小为640象素×480象素,体视显微镜的放大倍数为1.5倍,激光照射区域面积为4.2mm×3.2mm,CCD曝光时间为20ms。
用Matlab软件对原始的散斑图像进行处理,获得散斑衬比图和各时间点的伪彩色血流图,颜色越红代表相应的流速越快。以0min时的伪彩色血流图为基准,各时间点上的伪彩色血流图与它相比较,通过Matlab软件计算得出正常状态下10min时和压迫刺激后10min时脊髓血流动力学指标变化的百分数。
选择大鼠脊髓背部表面正中血管及其分支和血管旁无明显可见血管区域(原始面积为0.5mm×0.5mm)进行血流动力学的研究,监测血管旁无明显可见血管区域的血流速度(A)、血管1的血流速度(B)、血管2的血流速度(C)、血管2的管径(D)和血管2内血流量(E)的变化。
产品咨询:激光散斑血流成像仪可扫码添加工作人员微信,进实验交流群
参考文献:
苏昊,郑启新,骆清铭.激光散斑成像技术监测脊髓血流动力学的实验研究[J].华中科技大学学报(医学版),2009,38(01):106-109.
![]()
欢迎转发分享
特别声明:以上内容(如有图片或视频亦包括在内)为自媒体平台“网易号”用户上传并发布,本平台仅提供信息存储服务。
Notice: The content above (including the pictures and videos if any) is uploaded and posted by a user of NetEase Hao, which is a social media platform and only provides information storage services.