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人免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA Kit说明书

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人免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA Kit

作者:深圳市恒昊生物科技有限公司

什么是人免疫球蛋白及A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)

人免疫球蛋白A(IgA)是人体黏膜免疫的核心抗体,主要分布在呼吸道、消化道、泌尿生殖道的黏膜表面与分泌液中,负责抵御病原体入侵,是人体免疫防线的第一道屏障。而A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ,又称CD89)是IgA最重要的特异性受体,主要表达于单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等髓样免疫细胞表面。



CD89通过结合IgA的Fc段,可以触发吞噬细胞的吞噬作用、抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用,还能调控炎症因子释放,在抗感染免疫、自身免疫调节中发挥关键作用。当CD89表达异常时,可能与IgA肾病、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等自身免疫病,以及部分肿瘤的免疫逃逸相关,因此准确定量检测样本中CD89的水平,对相关疾病的机制研究、辅助诊断都有重要意义。

ELISA Kit(酶联免疫吸附检测试剂盒)是目前科研和临床检测中最常用的定量检测工具,人免疫球蛋白及A Fc段受体ⅠELISA Kit就是专门用于检测样本(血清、组织匀浆、细胞裂解液等)中CD89含量的商品化试剂。

检测实验中的预防措施

为了保证检测结果的准确性、避免实验污染、保障实验人员安全,实验全过程需要做好以下预防措施:

(一)样本处理与储存的预防

  1. 采集样本后需要尽快处理,血清/血浆样本建议采集后2小时内分离,避免样本反复冻融——反复冻融会导致CD89蛋白降解,造成检测结果偏低,若不能及时检测,应分装后置于-80℃冰箱保存,避免长期在-20℃储存。
  2. 避免样本被细菌污染,细菌会分解蛋白抗原,影响结果准确性,若样本出现浑浊、沉淀,请勿使用。

(二)实验操作的质量预防

  1. 试剂提前平衡:试剂盒从冰箱取出后,需要在室温(20-25℃)平衡至少30分钟,让试剂温度恢复到室温,否则会导致孔间吸光度差异大,标准曲线线性差,影响结果准确性。不同批次的试剂盒不可以混用,试剂不要过期使用。
  2. 加样误差预防:加样时尽量保证加样速度一致,避免样本加入时间差过大;加样时不要触碰孔壁,不要产生气泡,否则会导致显色不均。做标准曲线时建议做复孔,减少随机误差。
  3. 洗板不充分预防:洗板是去除非特异性结合、降低背景值的关键步骤,必须严格按照说明书次数洗板,手动洗板时每孔要注满洗涤液,每次浸泡30秒后再吸干,避免洗涤不充分导致背景偏高、结果假阳性。
  4. 显色反应控制:显色需要避光进行,温度控制在37℃,不要提前终止显色,要保证标准品的梯度颜色差异清晰后再加终止液,否则会导致曲线线性差。

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