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人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA Kit说明书

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人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA Kit

作者:深圳市恒昊生物科技有限公司

什么是人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA Kit

巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5,也被称为CCL15)是CC类趋化因子家族的成员,主要由活化的巨噬细胞、内皮细胞等分泌,能够趋化白细胞迁移到炎症部位,在免疫激活、炎症应答、肿瘤浸润等生理病理过程中发挥关键调控作用。当人体出现感染、自身免疫病或肿瘤病变时,体液或组织匀浆中的MIP-5含量会发生特征性变化,因此定量检测MIP-5的水平对相关疾病的辅助诊断、病程监测有重要意义。

而人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA Kit,就是预先配置好所有核心反应组分、标准化生产的成品ELISA检测试剂盒,可以快速对人来源的血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等样本中的MIP-5浓度进行定量检测。试剂盒一般会预先包被好MIP-5特异性抗体,同时配备MIP-5标准品、生物素标记的检测抗体、HRP标记的链霉亲和素、底物溶液、洗涤液、终止液等所有实验需要的组分,用户仅需要准备待测样本和基础实验设备,就可以完成检测,无需自行配置所有试剂,大幅降低了实验门槛。



注意事项

为了保证MIP-5检测结果的准确性和重复性,实验过程中需要注意以下几点:

(一)试剂与样本准备

  1. 试剂盒一般需要在2-8℃冷藏保存,长期不用建议分装后置于-20℃冻存,避免反复冻融酶标抗体和标准品,同时要避免试剂过期,使用前需要将所有试剂恢复至室温,保证反应温度均一。
  2. 待测样本要及时处理:血清血浆样本需要在采集后24小时内离心分装,-80℃冻存,避免反复冻融样本导致蛋白降解;组织匀浆样本需要加入蛋白酶抑制剂防止MIP-5降解,浑浊样本需要离心取上清后再加样,避免颗粒干扰吸光度读数。

(二)操作过程注意事项

  1. 加样时需要更换枪头,避免样本交叉污染,标准品和样本都建议做复孔检测,减少操作误差;加样时避免产生气泡,否则会导致读数偏差。
  2. 洗涤步骤是减少非特异性结合、降低背景值的关键,严格按照试剂盒要求的洗涤次数和洗涤液用量操作,洗板后可以在吸水纸上轻拍吸干残留液体,不要让孔板长时间干燥。
  3. 孵育过程要保证温度准确、时间合规,显色过程要避光,避免光照导致底物非特异性显色;当标准孔出现明显梯度蓝色后,即可及时终止反应,不要过度显色导致结果偏高。

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