m⁶A修饰精准解析 | GLORI技术实现单碱基定位与绝对定量

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m⁶A修饰与翻译调控

m⁶A是真核mRNA中最丰富的内部修饰之一，广泛参与RNA命运调控。近年来的研究表明，m⁶A不仅影响mRNA的稳定性、剪接与核输出等经典过程，更在蛋白质翻译层面发挥关键作用，例如调控翻译起始、影响核糖体加载以及参与uORF和非经典ORF的翻译调控等。

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现有m⁶A检测技术的局限性

尽管m⁶A研究已得到广泛关注，但现有检测方法在仍存在明显局限，限制了其在机制研究中的深入应用。

1、分辨率不足

MeRIP-seq等方法仅能提供区域性信号（约100–200 nt），无法精确到单碱基分辨率。

2、存在检测偏好性

依赖抗体或酶的检测策略易引入序列或结构偏好性（Bias），影响m⁶A位点识别的准确性与重复性。

3、缺乏定量能力

多数方法仅能判断是否存在修饰，难以获得m⁶A修饰比例及其动态变化。

4、低输入适配性差

对RNA起始量要求较高，难以应用微量样本。

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GLORI-seq技术服务

新使生物（NeoRibo）联合北京大学伊成器教授完成GLORI技术转化，推出GLORI-seq 2.0/3.0技术服务，实现稳定、高精度的m⁶A绝对定量分析。

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GLORI-seq技术原理

GLORI-seq是一种非抗体依赖的m⁶A单碱基定位与定量技术。

其核心原理是利用化学反应选择性区分未修饰腺苷（A）与m⁶A：通过脱氨反应，使RNA中绝大多数未修饰A转化为肌苷（I），在反转录和测序过程中被读取为G；而m⁶A由于N⁶位甲基的保护作用，对该反应具有抗性，因此仍被读取为A。

因此，通过比较特定位点测序结果中A与G的比例，不仅能够在单碱基水平定位m⁶A，还能够计算该位点的m⁶A修饰比例（stoichiometry），实现位点级绝对定量分析。

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m⁶A检测技术对比

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GLORI-seq版本对比

⭐相比GLORI 1.0，GLORI-seq 2.0显著降低RNA降解并提升检测灵敏度，GLORI-seq 3.0进一步突破样本量限制，实现微量样本的稳定检测。

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新使生物GLORI技术优势

✔单碱基分辨率：实现m⁶A位点级精准定位

✔绝对定量能力：评估m⁶A修饰比例，支持动态变化分析

✔极低偏好性：基于化学反应策略，避免抗体或酶引入的检测偏好性

✔高灵敏度：提高低丰度转录本m⁶A检测能力

✔低起始量：适用于低输入样本及微量样本

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新使生物GLORI-seq项目分类

针对不同样本量及研究需求，我们提供2项细分技术服务方案：

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常规量GLORI-seq 2.0

通过优化反应体系，降低RNA降解风险并提升检测稳定性，适用于常规及低输入样本。

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微量GLORI-seq 3.0

在2.0基础上引入新的建库策略，降低样本损失，实现超低输入条件下的稳定检测。

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应用场景

• m⁶A定量分析：实现位点级修饰比例评估及动态变化研究

• 翻译调控研究：结合Ribo-seq解析m⁶A对翻译效率及非经典ORF的影响

• 疾病机制研究：用于解析m⁶A在肿瘤等疾病中的调控作用

• 低输入样本研究：适用于分选细胞及微量临床样本

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平台优势

新使生物专业翻译组学平台，构建了覆盖RNA调控的翻译多组学技术体系：

1. 高分辨率Ribo-seq：解析核糖体占据与翻译动态

2. Polysome profiling：评估翻译活性与mRNA分布状态

3. RNC-seq：捕获核糖体结合RNA，反映翻译进行中的转录本

4. tRNA-seq：解析翻译系统的解码能力

5. tsRNA-seq：解析tRNA来源小RNA图谱

6. PAIso-seq：解析poly(A)尾长度与组成，连接mRNA稳定性与翻译效率

7. GLORI-seq：m⁶A绝对定量检测，探究RNA修饰对翻译调控的影响

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新使生物官方网站：www.neoribo.com

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新使生物专业翻译组学技术平台

新使生物NeoRibo长期专注于翻译组学技术研发与应用，已构建覆盖核糖体翻译、tRNA解码、RNA修饰及Poly(A)尾调控等多个层面的技术体系，提供从整体翻译活性、基因翻译效率到密码子分辨率翻译行为的系统解决方案，全面解析转录后及翻译过程中的精细调控机制。

新使生物专业翻译组一站式服务平台
产品名称

GLORI-seq 2.0/3.0 （m⁶A单碱基绝对定量检测）