IF 81，免疫检查点研究怎么总能发高分？

九月第一周，中南大学湘雅医院陶永光、肖德胜、刘双团队在 Signal Transduction and Targeted Therapy（信号转导与靶向治疗，中科院一区，IF = 81）发表重磅综述「Immune checkpoints and immunoregulation in metabolic diseases and cancers: pathological mechanisms and therapeutic potential」[1]，再次把免疫检查点这个热门研究推向风口浪尖。

过去大家普遍认为免疫检查点只负责肿瘤免疫逃逸，而该综述刷新这一认知：PD-1/PD-L1、CTLA-4 等分子不只是肿瘤的免疫刹车，还深度参与肥胖、糖尿病、自身免疫性甲状腺疾病等代谢疾病的免疫调控。综述还阐释了免疫检查点分子在代谢疾病和肿瘤中的病理调控机制，为代谢紊乱与肿瘤合并疾病的精准免疫干预提供了全新理论依据与治疗思路。

近年来，免疫检查点相关研究持续产出大量高分文章，一方面源于该方向突出的临床转化价值，免疫检查点阻断抗体已经革新了肿瘤的治疗模式，另一方面该研究范畴也在不断扩展，从肿瘤免疫延伸至代谢紊乱、自身免疫损伤等疾病领域。

随着靶点网络日趋复杂，除经典的 PD-1/PD-L1、CTLA-4 外，LAG-3、TIGIT、TIM-3、VISTA 等新型抑制性靶点也受到广泛关注。研究过程中更需要关注：靶蛋白真实表达水平、表达细胞来源、膜/胞内亚细胞定位、靶点间共表达或共抑制关系，以及表达是否受免疫激活、疾病进展、药物干预动态调控等等。解答这些问题离不开靶点检测抗体、功能封闭抗体、科研级生物类似药抗体、抗独特型抗体等多样化工具，高质量的抗体愈发重要。

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在研究过程中我们想要回答上述靶点相关问题，首先需要依靠抗体完成蛋白层面的数据采集，搭建起靶点开发的完整数据链。

抗体：建立靶点开发的数据链

免疫检查点靶点存在细胞特异性与表达异质性，仅依靠转录组数据，无法判断蛋白翻译、糖基化、膜转运等修饰状态，也不能确定靶点在肿瘤细胞、T 细胞、NK 细胞、髓系细胞上的真实分布。

借助抗体检测，才可以解析靶点特异性、识别表位以及动态表达特征。不同实验目的，对抗体性能要求截然不同：

因此，抗原验证需针对具体的应用，结合基因敲除、独立抗体、正交检测、标签蛋白或免疫捕获质谱等方案进行验证，不能将一种应用中的验证结果简单用于其他实验技术。

获得可靠靶点数据之后，抗体还将进一步渗透到从早期探索走向临床转化的各个环节，贯穿药物研发全流程。

抗体：从靶点发现到临床转化全流程

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靶点发现

免疫检查点早期研发需明确候选靶点在肿瘤、癌旁及正常器官中的表达水平与细胞来源，借助 WB、IHC、IF、FCM 抗体解析靶点的组织分布、亚细胞定位及诱导表达特征。其中 IHC/IF 适用于靶蛋白组织空间定位分析；FCM 可进一步区分 CD8⁺T 细胞、Treg、NK 细胞与髓系细胞亚群的靶点表达。

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机制探讨与模型构建

检测抗体可用于分析免疫检查点的共表达特征、受体-配体的细胞互作关系，以及药物干预引发的靶点内化、代偿上调、免疫细胞重塑等现象，为单药、双抗及联合治疗策略设计提供依据。

免疫检查点抑制剂的 Fab、Fc 结构域需分别评估：Fab 负责抗原表位结合；Fc 段介导 Fcγ 受体结合、靶细胞清除，同时影响抗体体内半衰期与组织分布。小鼠模型研究证实，抗 CTLA-4 抗体的抗肿瘤效应，除阻断靶点外，还依赖 Fcγ 受体介导的肿瘤浸润 Treg 细胞清除。

构建过表达/基因敲除细胞、肿瘤类器官、人源化动物模型开展抑制剂筛选时，可利用检测抗体验证工程化细胞蛋白稳定性、IFN-γ 刺激后的靶点诱导表达，保障不同批次原代细胞、动物模型的靶点水平一致性。

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抗体筛选与药理评价

进入药物筛选阶段，通过 ELISA、SPR、BLI 测定候选抗体结合活性、亲和力与解离速率；结合竞争实验、细胞共培养体系验证分子互作与细胞层面功能，可选用科研级生物类似抗体作为阳性对照，横向比对候选分子的结合与功能表现。

在细胞结合、配体阻断、T 细胞激活、肿瘤杀伤实验中，检测抗体能够校准靶点密度、确定刺激时间窗口，分析给药前后靶点内化、降解与再表达情况，也可用于双靶点共表达细胞的筛选鉴定。

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临床转化阶段的应用

检测抗体可进一步用于临床阶段的伴随诊断、生物标志物的开发。传统生物标志物（如 PD-L1）、肿瘤突变负荷、微卫星不稳定等已进入临床指南，但存在单指标预测效能不足的问题，科研人员正在探索更精准的联合标志物体系。

免疫检查点抗体怎么选？

基本信息确认（靶点、物种反应性、克隆号、价格）之外，我们需要重点核查 4 个维度：

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对应目标实验场景的验证数据：WB 有效 ≠ 流式/IHC 可用；流式需活细胞验证，IHC 需石蜡组织验证。

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表位与样本处理条件：区分抗体识别天然表位还是变性表位；评估固定、透膜、抗原修复等操作会不会破坏抗原识别。

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荧光偶联验证：经过偶联验证的抗体，在多色流式、FMO 对照、Fc 阻断实验中表现更稳定，避免亲和力下降、背景偏高。

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特殊实验需求：比如功能实验确认配体中和/阻断活性；药物筛选关注和候选治疗抗体的表位竞争关系；长期项目优先选择序列确定、批间一致性优异的重组抗体。

围绕 PD-1、PD-L1、CTLA-4、LAG-3、TIGIT、TIM-3、VISTA 热门靶点，义翘神州可提供适配 WB、IHC、IF、流式、ELISA 多平台成套抗体及荧光偶联产品，产品均完成对应实验场景验证，覆盖靶点验证、免疫分型、给药后动态检测等各类科研场景，帮助科研人减少抗体验证试错成本，适配免疫检查点从靶点探索到药理评价的全流程研究，让实验开展更加省心高效。

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内容策划：邹礼平

内容审核：周育红

题图来源：图虫创意

参考文献：

[1] Xiang M, Liu S, Xiao D, Tao Y. Immune checkpoints and immunoregulation in metabolic diseases and cancers: pathological mechanisms and therapeutic potential. Signal Transduct Target Ther. 2026 Sep 2;11(1):360. doi: 10.1038/s41392-026-02810-5. PMID: 42680727; PMCID: PMC13534467.