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师弟
师姐,我又把攒了好久的珍贵样本霍霍完了,就为了提那点微量 RNA。组织量少得可怜,TRIzol 法提不出来,离心完管底干干净净,看不见沉淀。
TRIzol 对付这种微量样本本来就很容易翻车,稍微不注意 RNA 要么降解要么直接没了。你试试EZBioscience®8 分钟 RNA 快速提取试剂盒(货号:B0004DP),我之前处理过好几次微量组织和少量细胞的样本,回收效果很稳定。不用做乙醇沉淀,也不用碰有毒试剂,室温就能直接裂解,自带 DNase 处理步骤去除残留基因组 DNA,8 分钟就能拿到纯度浓度都在线的 RNA,后续跑 RT-PCR、RT-qPCR 都没问题。
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师姐
如果你也为提 RNA 头痛,快来免费试用这款
8 分钟 RNA 快速提取试剂盒(B0004DP)
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该试剂盒采用特殊的样品裂解和洗涤系统,无需苯酚、氯仿抽提等步骤,简单快速,结果稳定(已有大量文献使用本产品发表)。
产品特点:
适用范围广:能够从大部分的动物组织(适用于内脏组织、肿瘤组织、角膜、囊膜等,不适用于肌肉、皮肤等坚韧的组织)和细胞中提取得到高质量的 RNA;
简单、快速:8 到 15 分钟即可得到高质量的 RNA;
纯度高:A260/280 和 A260/230 基本在 2.0 左右,可直接用于下游 RT、qPCR 等实验;
安全无毒:不含苯酚等,无需氯仿、异丙醇、DEPC 水等致癌物质,对身体无害;
基因组充分去除:配有 gDNA Remover(DNase),可有效去除 DNA 污染;
所需样品少:最低可提取 1 mg 组织(部分组织)或者 5 万细胞的 RNA。
操作流程:
细胞或组织样品在裂解液中充分释放 RNA,裂解产物加入等体积的无水乙醇,之后通过RNA 结合离心吸附柱、DNase 处理、洗涤和洗脱这 4 步,即可获得高质量的 RNA,可用于 RT-PCR、RT-qPCR 等实验。
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代表性实验结果:
本试剂盒(EZ-press RNA Purification Kit)与 TRIzol 方法的对比测试结果见下图。实验内容:检测 A549 细胞中 4 个不同基因的 mRNA 表达水平。实验结果表明:使用 EZ-press RNA Purification Kit 得到了优异的结果,比 TRIzol 法得到的结果更好,两组结果的相关系数可达 R2=0.9898。
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下图:M:250bp DNA Ladder。Lanes 1~3 为 EZ-press RNA Purification Kit 提取的 A549 细胞 RNA;Lanes 4~6 为 TRIzol 方法提取的 A549 细胞 RNA。Lanes 1、4:20 万细胞;Lanes 2、5:40 万细胞;Lanes 3、6:60 万细胞。
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结果表明,EZ-press RNA Purification Kit 能够很好地替代 TRIzol 方法进行细胞 RNA 的提取及逆转录,得到的结果优于 TRIzol 方法。
目前正在使用EZBioscience®RNA 提取试剂盒的单位:中科院上海生化细胞所、中科院上海药物所、中科院上海巴斯德所、中科院上海营养与健康所、中科院广州生物健康院、复旦大学、上海交通大学、浙江大学、中山大学、同济大学、华东师范大学、上海科技大学、上海中医药大学、南方医科大学、天津医科大学、广州医科大学、华南农业大学、瑞金医院、中山医院、华山医院、仁济医院、上海红房子医院、复旦附属眼耳鼻喉医院、交大附属六院、交大附属九院、孙逸仙纪念医院、国家儿童医学中心、国家呼吸医学中心等等。
另外,EZBioscience®RNA 提取关联产品如下,欢迎了解选购。
A0010CGQ(高效快速逆转录试剂盒)
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RT4C(带 gDNA Remover 的超快速彩色一步逆转录试剂盒)
(本试剂与 A0010CGQ 相比,不需要单独进行去除基因组 DNA 的反应,操作更简便,并可有效降低复杂加样过程造成的样品污染与 RNA 降解的风险,基因组去除与逆转录一步完成,5 min 即可完成逆转录。)
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A0016-R2(高效快速彩色qPCR Mix)
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内容策划:沈佳钰
内容审核:朱超敏
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